兔elisa檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫
根據(jù)項(xiàng)目溝通結(jié)果確定制備抗體的種類,一般夾心ELISA需要不同表位的抗體用做配對,建議同時(shí)進(jìn)行多克隆抗體和單克隆抗體的制備。確保的獲得高靈敏度的配對方式。其他類型的ELISA根據(jù)具體情況選擇。
1、兔elisa檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫
使用部分制備的免疫原免疫2只新西蘭兔和5只BALB/c鼠分別用于多克隆抗體及單克隆抗體的制備。免疫4-5次,收集抗血清檢測效價(jià),ELISA效價(jià)大于10萬以上進(jìn)行多克隆抗血清收集及單克隆抗體雜交瘤制備。
2、兔elisa檢測試劑盒單克隆抗體雜交瘤制備
選擇與重組蛋白和天然蛋白免疫反應(yīng)強(qiáng)的小鼠進(jìn)行細(xì)胞融合,通過ELISA篩選陽性克隆,將陽性克隆進(jìn)行亞克隆獲得陽性細(xì)胞株。將陽性克隆上清進(jìn)行表位鑒定,反應(yīng)性鑒定及親和力鑒定。選擇不同表位,反應(yīng)性強(qiáng)且親和力高的細(xì)胞株進(jìn)行后續(xù)抗體生產(chǎn)。
3、兔elisa檢測試劑盒抗體生產(chǎn)
多克隆抗血清進(jìn)行抗原親和純化,獲得特異性抗體10-20mg。
單克隆抗體生產(chǎn)選擇所需陽性細(xì)胞株進(jìn)行細(xì)胞擴(kuò)增,腹水制備,通過蛋白A親和純化獲得3-5mg純化抗體。